EUROIMMUN microplate ELISA

EUROIMMUN微孔板ELISA

測(cè)試原理

• 涂有純化，生化特性已鑒定的抗原的聚苯乙烯微孔板條用作包含結(jié)合抗原的固相。
• 如果樣品呈陽(yáng)性，則稀釋的血清樣品中的特異性抗體會(huì)附著在與固相偶聯(lián)的抗原上。
• 第二步，用過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗人抗體檢測(cè)附著的抗體。
• 第三步，使用能夠促進(jìn)顯色反應(yīng)的色原/底物溶液使結(jié)合的抗體可見(jiàn)。產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與血清樣品中抗體的濃度成正比。
• 單特異性ELISA（具有單個(gè)抗原的酶免疫測(cè)定）為檢測(cè)抗體提供了定量的體外測(cè)定。“ Profile ELISA”提供了一種半定量體外測(cè)定法，用于檢測(cè)單個(gè)微孔板條上的不同抗體。
• “ Pool ELISA”的固相涂有抗原混合物，用于半定量檢測(cè)抗體，其特異性必須隨后通過(guò)單特異性測(cè)定進(jìn)行研究。

可靠，經(jīng)濟(jì)的校準(zhǔn)/評(píng)估

• 在定量ELISA的情況下，通常使用三個(gè)校準(zhǔn)血清進(jìn)行校準(zhǔn)。

-校準(zhǔn)血清1：測(cè)量范圍的上限
-校準(zhǔn)血清2：正常范圍的上限（臨界值）
-校準(zhǔn)血清3：陰性

• 無(wú)需孵育空白值或重復(fù)測(cè)定。
• 僅使用一個(gè)校準(zhǔn)器即可進(jìn)行半定量ELISA。在某些ELISA中可找到擴(kuò)展的校準(zhǔn)曲線，用于免疫測(cè)定或CSF診斷。
• 以相對(duì)單位（RU / ml）進(jìn)行校準(zhǔn)，如果存在參考血清，則以單位（IU / ml）進(jìn)行校準(zhǔn)。
• 可以選擇使用測(cè)試套件中包含的陽(yáng)性或陰性對(duì)照血清來(lái)執(zhí)行每個(gè)測(cè)試。提供了每種校準(zhǔn)物和對(duì)照血清的試劑盒特定參考范圍。
• 使用常規(guī)ELISA軟件可以輕松執(zhí)行所有校準(zhǔn)方法。

簡(jiǎn)單，快速，經(jīng)濟(jì)的處理

• 含有斷裂孔的微孔板條（Profile ELISA除外）。
• 為避免混淆，微孔板條或試劑孔上印有抗原縮寫(xiě)。
• 準(zhǔn)備使用的試劑（洗滌緩沖液：濃縮液）。
• 顏色編碼可以清楚地識(shí)別試劑。

- 暗紅色：校準(zhǔn)血清1 
- 紅色：校準(zhǔn)血清2 
- 淡紅色：校準(zhǔn)血清3 
- 深藍(lán)色：陽(yáng)性對(duì)照血清
- 綠色：陰性對(duì)照血清
-樣品緩沖液和抗人Ig POD綴合物：不同的顏色

• 傳染性血清學(xué)ELISA（檢測(cè)IgM類抗體）的樣品緩沖液已經(jīng)包含IgG / RF吸收劑。
• 與所有商用洗衣機(jī)和閱讀器系統(tǒng)兼容。

低抗體抗體的測(cè)定

• 通過(guò)研究抗體的親和力已經(jīng)建立了新鮮感染的血清學(xué)診斷的替代原理。
• 感染后免疫系統(tǒng)的一個(gè)反應(yīng)是低抗體的形成。隨著感染的進(jìn)行，越來(lái)越多的抗原適應(yīng)性IgG形成，并且親和力增加。只要尚未在血清中檢測(cè)到高親和力的IgG，就可以認(rèn)為感染仍處于早期階段。
• 為了鑒定患者血清中的低抗體抗體，平行進(jìn)行了兩次酶標(biāo)板ELISA：一項(xiàng)以常規(guī)方式進(jìn)行測(cè)試，另一項(xiàng)包括在患者血清與過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG孵育之間進(jìn)行尿素處理，結(jié)果低抗原性抗體與抗原的分離。
• 如果通過(guò)尿素處理顯著降低ELISA的滅絕率，則存在低抗體抗體。為了客觀地解釋，可以在有和沒(méi)有尿素孵育的情況下，從測(cè)量值中計(jì)算出相對(duì)親和力指數(shù)（RAI）。
• 血清稀釋度1：100，共軛類抗人IgG，POD標(biāo)記。
• 3點(diǎn)校準(zhǔn)，定量（IgG）。
• 可以使用以下檢測(cè)試劑盒來(lái)確定親和力：弓形蟲(chóng)，CMV，麻疹病毒，風(fēng)疹病毒，VZV，TBE病毒，EBV-CA。

腦脊液中的抗體測(cè)定

• 適應(yīng)癥：大腦局部感染。
• CSF稀釋度1：2，血清稀釋度1：404。綴合類別抗人IgG或IgM，POD標(biāo)記。
• 易于操作：即用型試劑。
• 4點(diǎn)校準(zhǔn)，定量。相同的孵育條件和時(shí)間（室溫； 60分鐘/ 60分鐘/ 15分鐘）：用于CSF診斷的所有EUROIMMUN ELISA可以毫無(wú)困難地組合在一塊相同的微孔板上。
• 在一塊相同的微孔板上平行于CSF中的抗體濃度確定患者血清中的抗體濃度。CSF /血清商CSQ _路徑。從兩個(gè)測(cè)量值計(jì)算得出。
• 如果特異性抗體CSQ _路徑的CSF /血清商數(shù)存在，則存在鞘內(nèi)特異性抗體的合成_。顯著高于整個(gè)IgG的CSF /血清商（CSQ _total）或CSQ _lim（如有必要）_。。這兩個(gè)值的關(guān)系表示相對(duì)CSF /血清商CSQ _rel。（同義詞：抗體特異性指數(shù)，ASI）。
• 結(jié)果解釋（根據(jù)Reiber教授的建議）：
• CSQ _rel。<0.6：結(jié)果不可靠，請(qǐng)檢查
  CSQ _rel是否存在錯(cuò)誤_。0.6-1.3：標(biāo)準(zhǔn)范圍
• CSQ _rel。1.3-1.5：邊界范圍
  CSQ _{相對(duì)。}> 1.5：指示中樞神經(jīng)系統(tǒng)中病原體特異性抗體的產(chǎn)生
• 用于CSQ _rel的自動(dòng)計(jì)算_。EUROIMMUN免費(fèi)提供特定的Excel表。
• 高的靈敏度，特異性和可重復(fù)性。血清和腦脊液中的抗體濃度可以在整個(gè)線性測(cè)量范圍內(nèi)確定。
• 提供以下用于CSF診斷的測(cè)試試劑盒：伯氏疏螺旋體，弓形蟲(chóng)，HSV-1，HSV-2，HSV-1 / 2池，CMV，風(fēng)疹病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，VZV，TBE，EBV-CA。
• 所有用于CSF診斷的測(cè)試系統(tǒng)也只能用于血清學(xué)。
• *適合于孵化設(shè)備中的自動(dòng)孵化。
•  

孵化

微孔板ELISA孵育

移液器：
每孔100 µl

孵育：
30分鐘

移液器：
每孔100 µl

孵育：
30分鐘

移液器：
每孔100 µl

孵育：
15分鐘

移液器：
每孔100 µl

評(píng)估：

波長(zhǎng)為450 nm的光度測(cè)量

另請(qǐng)參閱自動(dòng)化選項(xiàng)。

執(zhí)行測(cè)試時(shí)，將使用當(dāng)前有效的測(cè)試指令。